PCR產物量過少處理辦法

    日期:2022-11-30 11:21
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    摘要: PCR產物量過少處理辦法: 1、退火溫度不合適。以2度為梯度設計梯度PCR反應優化退火溫度。 2、DNA模板量太少。增加DNA模板量。 3、PCR循環數不足。增加反應循環數。 4、引物量不足。增加體系中引物含量。 5、延伸時間太短。以1 kb/min的原則設置延伸時間。 6、變性時間過長。變性時間過長會導致DNA聚合酶失活。DNA模板中存在抑制劑。確保DNA模板干凈。

    PCR產物量過少處理辦法:

    1、退火溫度不合適。以2度為梯度設計梯度PCR反應優化退火溫度。

    2、DNA模板量太少。增加DNA模板量。

    3、PCR循環數不足。增加反應循環數。

    4、引物量不足。增加體系中引物含量。

    5、延伸時間太短。以1 kb/min的原則設置延伸時間。

    6、變性時間過長。變性時間過長會導致DNA聚合酶失活。DNA模板中存在抑制劑。確保DNA模板干凈。



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