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PCR產物量過少處理辦法
日期:2022-11-30 11:21
瀏覽次數:339
摘要:
PCR產物量過少處理辦法:
1、退火溫度不合適。以2度為梯度設計梯度PCR反應優化退火溫度。
2、DNA模板量太少。增加DNA模板量。
3、PCR循環數不足。增加反應循環數。
4、引物量不足。增加體系中引物含量。
5、延伸時間太短。以1 kb/min的原則設置延伸時間。
6、變性時間過長。變性時間過長會導致DNA聚合酶失活。DNA模板中存在抑制劑。確保DNA模板干凈。
PCR產物量過少處理辦法:
1、退火溫度不合適。以2度為梯度設計梯度PCR反應優化退火溫度。
2、DNA模板量太少。增加DNA模板量。
3、PCR循環數不足。增加反應循環數。
4、引物量不足。增加體系中引物含量。
5、延伸時間太短。以1 kb/min的原則設置延伸時間。
6、變性時間過長。變性時間過長會導致DNA聚合酶失活。DNA模板中存在抑制劑。確保DNA模板干凈。